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大鼠肝微粒体制备过程中活性保存的关键因素探析
2025-09-18
大鼠肝微粒体制备过程中,活性保存是确保实验结果可靠性的核心环节,其关键因素涵盖从动物处理到最终保存的全流程控制,具体如下:一、动物选择与预处理成年健康大鼠是制备高活性微粒体的基础,因其肝脏代谢能力强、微粒体含量高。实验前需禁食24小时以减少肝糖原干扰,提高回收率。若需诱导酶活性,可在处死前5天腹腔注射多氯联苯(PCB),剂量为300mg/kg,以增强细胞色素P450等代谢酶的表达。二、低温操作与缓冲液优化全程需在0-4℃冰浴环境中进行,避免酶热变性。缓冲液需维持适宜离子强度与...
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兔肝微粒体在各行业中都发挥着重要作用
2025-09-15
兔肝微粒体富含细胞色素P450(CYP450)酶系,成为解析外源性物质代谢途径、评估药物相互作用与毒性风险的重要生物工具。兔肝微粒体在药物研发、环境毒理、食品安全与基础生命科学中发挥着重要的作用,为人类理解“化学物质在体内的命运”提供了高效、灵敏的体外模型。一、药物研发在新药开发早期,兔肝微粒体被广泛用于评估候选化合物的体外代谢稳定性。通过孵育药物分子与微粒体,在NADPH供能条件下,模拟肝脏Ⅰ相代谢反应(如氧化、还原、水解),快速识别代谢“热点”与潜在毒性代谢物。相比全细胞...
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养原代细胞,您还为贴壁发愁吗?
2025-09-09
引言开学了,实验室原代细胞试验开始了,我的实验室环境(培养箱温度稳定在37±0.5℃,细胞操作环境无菌,维持在25℃以上)正常,血清、培养基等也按照SOP正确添加,为啥细胞贴壁效果不太好?一、原代细胞为什么要包被?贴壁生长成为原代细胞体外培养的核心条件,直接影响实验结果的可靠性和细胞功能表达。在原代细胞培养过程中,需要包被处理以增强贴壁能力。二、如何选择合适的包被材料?为了适应不同实验需要,需要对培养器皿(培养瓶/培养板)用不同的物质包被后使用,既可以促进细胞...
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Ⅰ型鼠尾胶原应用场景(四)——病理机制
2025-09-04
一、Ⅰ型鼠尾胶原Ⅰ型鼠尾胶原(Collagenfromrattail,TypeI)是一种天然的培养基,常用于细胞培养。它是从大鼠尾部肌腱提取的Ⅰ型胶原蛋白溶液,呈液态,溶解在弱醋酸中保存。它是细胞外基质(ECM)的核心成分之一,在体内广泛分布于皮肤、骨骼、肌腱等结缔组织,具有天然的三螺旋结构。这种结构可被细胞表面受体(如整合素α1β1、α2β1)别,从而启动细胞黏附与信号传递。二、还原病理现场鼠尾胶原通过其三维网络结构(纤维直径约50-200nm),精准模拟人体组织中的细胞外...
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超越大鼠模型:为何猪肝微粒体在预测人类药物代谢方面更具优势?
2025-08-21
猪肝微粒体在预测人类药物代谢方面展现出显著优势,其核心优势源于种属间代谢酶的高度相似性、代谢通路的全面覆盖以及实验模型的可操作性,具体可从以下三方面解析:一、代谢酶同源性:CYP450亚型与人类高度重叠猪肝脏中细胞色素P450(CYP450)酶系的亚型分布与人类具有显著相似性。例如,猪肝微粒体中的CYP3A亚家族(负责代谢约50%的临床药物)与人类CYP3A4的底物特异性高度一致,而大鼠CYP3A1/2的代谢谱与人类存在差异。此外,猪肝微粒体中的UGT(葡萄糖醛酸转移酶)和S...
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小鼠肝微粒体能够高效模拟药物在体内的生物转化过程
2025-08-21
在新药研发与毒理学研究领域,小鼠肝微粒体被誉为探索药物代谢命运的探针,是体外评估化合物代谢稳定性、代谢途径及药物相互作用的核心工具。其源自小鼠肝脏细胞的内质网碎片,经匀浆、离心分离后获得,富含细胞色素P450(CYP450)酶系、UDP-葡萄糖醛酸转移酶(UGT)等Ⅰ相与Ⅱ相代谢酶,能够高效模拟药物在体内的生物转化过程。一、核心功能:还原体内代谢环境小鼠作为常用的模式生物之一,其肝微粒体中的CYP酶(如CYP3A、CYP2D、CYP2C家族)在功能上与人类部分同工酶具有相似性...
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猪肝微粒体能够帮助更好地理解药物在体内的转化过程及潜在的毒性反应
2025-08-13
猪肝微粒体是从猪肝脏组织中提取的一种亚细胞结构,主要包含内质网膜系统。这些微粒体富含多种酶系,尤其是细胞色素P450酶系(CYP450),它们是参与药物代谢的关键酶类。通过使用猪肝微粒体,研究人员可以在体外条件下模拟肝脏内的生化反应,从而更好地理解药物在体内的转化过程及潜在的毒性反应。一、制备1、材料准备选择新鲜或冷冻保存的猪肝脏作为原料。确保来源可靠,并符合实验所需的卫生标准。准备必要的实验器材,如高速离心机、匀浆器、超声波破碎仪等,以及各种缓冲液和试剂。2、组织匀浆将猪肝...
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Ⅰ型鼠尾胶原应用场景(三)——药物筛选
2025-08-04
一、Ⅰ型鼠尾胶原Ⅰ型鼠尾胶原(Collagenfromrattail,TypeI)是一种天然的培养基,常用于细胞培养。它是从大鼠尾部肌腱提取的Ⅰ型胶原蛋白溶液,呈液态,溶解在弱醋酸中保存。它是细胞外基质(ECM)的核心成分之一,在体内广泛分布于皮肤、骨骼、肌腱等结缔组织,具有天然的三螺旋结构。这种结构可被细胞表面受体(如整合素α1β1、α2β1)别,从而启动细胞黏附与信号传递。二、核心优势Ⅰ型鼠尾胶原蛋白因其仿生特性,在药物筛选中展现出不可替代的核心优势,具体如下:生物相容性...