纤维细胞试剂盒,尤其是基于酶联免疫吸附试验(ELISA)原理的试剂盒,是生物医学研究和临床诊断中的重要工具,其工作原理与独特优势如下:
工作原理
纤维细胞试剂盒(以成纤维细胞生长因子ELISA试剂盒为例)主要基于双抗体夹心法或竞争法原理工作:
双抗体夹心法:将特异性抗体包被在微孔板上作为固相抗体,加入样本后,样本中的抗原(如成纤维细胞生长因子)与固相抗体结合。随后加入酶标记的特异性抗体,形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤去除未结合的成分后,加入底物显色,通过酶标仪测定吸光度,从而计算出样本中抗原的浓度。
竞争法:向预先包被了抗体的酶标孔中加入样本和生物素标记的识别抗原,两者与固相抗体竞争结合形成免疫复合物。经洗涤后,加入亲和素-HRP,催化底物显色。吸光值与样本中抗原的浓度成负相关,通过标准曲线计算出样本中抗原的浓度。
独特优势
高灵敏度:能够检测到低浓度的纤维细胞生长因子,有助于准确测定样品中的水平。
高特异性:与人源纤维细胞生长因子高度特异性结合,避免与其他相关因子的交叉反应。
操作简便快速:采用酶联免疫吸附试验原理,操作步骤相对简单,且实验时间较短。
结果准确可靠:通过标准曲线计算样本浓度,结果客观准确,且重复性好。
适用范围广:适用于多种类型的样本,如血清、血浆、细胞培养上清液等。