特级胎牛血清是通过母牛剖腹产胎牛心脏密闭穿刺采血获得的新鲜胎牛全血,经自然层析、离心后收集得到去除血细胞、纤维蛋白等成分的淡黄色透明上清液体,后经生产使用多级高置流膜过滤技术和三级0.1?m终端微滤方法处理后,常用于细胞培养相关实验。
下面小编要与大家分享的是特级胎牛血清的主要生产步骤:
1、固定和麻醉
采集的关键技术主要是怀孕母牛的剖腹产和太牛的全封闭无菌心脏穿刺采血,对怀孕8个月左右的母牛进行剖腹产,产前采用侧卧保定方法固定。麻醉采取全身麻醉和术部局部麻醉相结合的方法,确实有效的麻醉师顺利进行剖腹产的重要保障。
2、母牛剖腹,心脏穿刺
手术切口位置选择在左肷窝腹壁的上三分之一处,优点是靠近子宫角便于手术中缝合快速收缩的子宫,其次是内容物不易流入腹腔,减少腹腔被污染而带来腹,盆两腔感染引发生殖系统器质性病变的风险。因子宫收缩极快,故在胎牛取出的同时要快速缝合,然后进行心脏穿刺采血。
3、原血采集
采血前器具全部消毒,探明胎牛心脏搏动明显部位,消毒后针管垂直穿刺心脏采血。
4、冷冻离心
将原血尽快放入冷冻离心机中3400r/min,30min。收集血清,冻存。
5、成品生产和定级
首先做好原血清解冻工作,26℃热风均匀循环解冻然后0.1μm三次过滤,避免病原微生物的污染。此过程会对血清检测和定级。全程在万级到十万级净化车间完成,全程做好记录,包括母牛资料,生产过程记录和每只胎牛血清数量以及容器编号,方便检测和血清溯源。
6、分装贴标保存
成品血清分装贴标后需迅速储存在-20℃以下快速冷冻24小时以上。