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TA1535Ames菌株

简要描述:遗传毒性试验在食品、药物、化妆品、环境等各领域安全检测及评价上得到了广泛应用.其中比较常见的是TA1535Ames菌株试验,也是经典的测试化学物或药物致突变实验.

  • 产品厂地:无锡市
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2022-08-24
  • 访  问  量: 778

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详细介绍

品牌CHI SCIENTIFIC/齐氏生物货号6-1704
规格10管/套供货周期一周
主要用途Ames试验
  一、TA1535Ames菌株产品介绍
 
  遗传毒性试验在食品、药物、化妆品、环境等各领域安全检测及评价上得到了广泛应用。其中比较常见的是TA1535Ames菌株试验,也是经典的测试化学物或药物致突变实验,该法测定主要在培养皿中进行,具有简单、快速、精确而又灵敏的特点,被世界各国广泛采用。为了使以上试验条件更接近于哺乳动物的代谢情况,在测试系统中加入哺乳动物微粒体酶(S9),可弥补体外试验缺乏代谢活化系统之不足。
 
  齐氏生物提供的沙门氏菌株(TA97a、TA98、TA100、TA102、TA1535)TA1535(Ames试验)和WP2uvrA大肠杆菌(Ames试验),经过鉴定,菌株特性与活菌数量符合Ames试验国家标准,并以甘油菌的形式提供,融化后可直接使用。为了保证试验效果,建议搭配齐氏生物研发的S9代谢活化系统一起使用。
 
  二、保存条件
 
  干冰运输,-80℃保存。
 
  三、TA1535Ames菌株注意事项
 
  1、在使用过程中要特别注意避免培养基污染菌株。
 
  2、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
 
  3、为了您的健康和安全,请穿实验服并戴好一次性手套进行无菌操作。
 
  四、鉴定项目
 
  1、脂多糖屏障丢失(rfa)用接种环或一端挠起的接种针以无菌操作术取各菌株的增菌培养液,在营养琼脂平板上分别划平行线,然后用灭菌尖头镊夹取灭菌滤纸条,浸湿结晶紫溶液,贴放在平板上与各接种平行线垂直相交。盖好皿盖后倒置于37t温箱,培养24h后观察结果。
 
  2、R因子划线接种,贴放滤纸条及培养等均同上,唯滤纸条浸湿的药液不同,为氨苄青霉素钠溶液。TA102除pKM101外,还有pAQ1,载有抗四环素的基因,故另用滤纸条浸湿四环素溶液后贴放于划线接种的平板上。
 
  3、紫外线损伤修复缺陷(△uvrB)在营养琼脂平板上按上述方法划线接种后,一半接种线用黑玻璃遮盖,另一半暴露于紫外光下8sec,然后盖好皿盖并用黑纸包裹平皿,防止可见光修复作用。培养同上。
 
  4、自发回变预先制备底平板;向灭菌并在水浴内保温45℃的上层软琼脂中注入0.1ml菌液;混匀后倾于底平板上并铺平。平皿倒置于37℃温箱培养48h。
 
  5、回变特性——诊断性试验上层软琼脂中除菌液外,还注入已知阳性物之溶液,需活化系统者并加入S9mix,余同上。
 
  6、斑点试验吸取测试菌增菌培养后的菌液0.1ml,注入融化并保温45℃左右的上层软琼脂中,需S9活化的再加0.3ml-0.4mlS9mix,立即混匀,倾于底平板上,铺平冷凝。用灭菌尖头镊夹灭菌圆滤纸片边缘,纸片浸湿受试物溶液,或直接取固态受试物,贴放于上层培养基的表面。同时做溶剂对照和阳性对照,分别贴放于平板上相应位置。平皿倒置于37℃温箱培养48h。在纸片外围长出密集菌落圈,为阳性;菌落散布,密度与自发回变相似,为阴性。
 
  7、平板掺入试验将一定量样液和0.1ml测试菌液均加入上层软琼脂中,需代谢活化的再加0.3ml-0.4mlS9mix,混匀后迅速倾于底平板上铺平冷凝。同时做阴性和阳性对照,每种处理做3个平行。试样通常设4个~5个剂量。选择剂量范围开始应大些,有阳性或可疑阳性结果时,再在较窄的剂量范围内确定剂量反应关系。培养同上。同一剂量各皿回变菌落均数与各阴性对照皿自发回变菌落均数之比,为致变比(MR)。MR值≥2,且有剂量-反应关系,背景正常,则判为致突变阳性。

 

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