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肝星状细胞常用的制备方法分享

更新时间:2023-11-14  |  点击率:182
  肝星状细胞是一类非专业免疫细胞,主要分布在肝脏的间质空间中。它们富含维生素A,并以其特殊的星形外观而得名。在正常情况下,它处于静止状态,并参与调节肝脏的生理功能,如合成和储存胶原蛋白、调控血管张力等。然而,在肝脏损伤或疾病发展过程中,肝星状细胞会被激活并转化为纤维母细胞样表型,参与了纤维化反应和组织修复过程。
 

 

  为了深入了解其生物学特性以及在肝脏疾病中的作用机制,科学家们开展了大量的实验研究,并提出了多种制备方法。其中,常用的方法是从小鼠或人类肝脏组织中分离和培养肝星状细胞。
 
  首先,需要获取新鲜的肝脏组织样本。对于小鼠实验,可以通过解剖小鼠并迅速取出肝脏来获取样本。对于人类实验,通常从手术切除的肝脏组织中获取样本。然后,将组织切成小块,并使用消化酶(如胰蛋白酶)进行消化。消化后的细胞悬液经过离心分离,得到一个包含多种细胞类型的混合物。
 
  接下来,利用密度梯度离心法将混合物进行分层。这一步可以根据不同细胞类型的密度差异将肝星状细胞与其他细胞分离开来。通常采用50% Percoll溶液制备密度梯度,并在高速离心后收集位于特定密度层上的细胞。
 
  分离得到的细胞可以通过培养在适当的培养基中进行扩增和传代。培养基通常包含适当浓度的血清、营养物质和生长因子,以提供细胞所需的营养和生长条件。在培养过程中,它会逐渐失去其星形外观,并转化为纤维母细胞样表型。
 
  肝星状细胞的制备方法不仅在科学研究中有重要意义,还在临床应用中具有潜力。由于它参与了肝脏纤维化的发生和发展,研究人员可以利用制备得到的肝星状细胞来探索抗纤维化药物的筛选和评估。此外,还可以作为药物输送系统的靶向载体,在治疗肝脏相关疾病时发挥作用。