ICH S13落地：寡核苷酸“豁免”，S9试剂需求走向精准化

导语

2026年6月2日至3日，ICH在巴西里约热内卢召开半年度大会。这是ICH在南美举办半年度会议，12个技术工作组集中讨论，S13寡核苷酸类药物非临床安全性评价指南的进展成为焦点之一。大会确认S13取得实质性进展，草案进入公开征求意见前的关键阶段。对于遗传毒理检测领域而言，S13带来的不只是“成熟修饰体系可豁免常规遗传毒性试验"的监管变化，更是一次Ames试验与S9试剂需求的重新分配：常规项目减量，新型修饰结构与GalNAc-siRNA的安全确认需求更加集中。GLP机构如何在新逻辑下选择S9试剂？

图1：ICH S13推进时间轴

一、S13的核心逻辑：为什么寡核苷酸可以“豁免"？

S13指导原则的制定，并非凭空而来。其科学基础是长达20年的行业数据积累。

一项针对2004至2024年间91个非编码寡核苷酸产品欧洲科学建议的分析显示：所有已报告的遗传毒性试验结果一致为阴性。欧盟监管机构明确表示：如果能够证明足够的“类别经验"，就可以偏离标准试验组合。这一立场为S13的“豁免"条款奠定了监管共识基础（详见图2）。

图2：S13遗传毒性分级评价框架

二、遗传毒性“豁免"的科学基础

——20年数据积累：一致阴性

欧盟监管机构对91个ONTs的审评数据分析表明，对于硫代磷酸酯（PS）、2‘-甲氧基乙基（2’-MOE）和2‘-O-甲基（2’-OMe）等充分表征的化学修饰，标准试验组合已被监管机构认定为“冗余"。

——暴露验证：阴性结果“真实有效"

2016年发表的一项关键研究，通过暴露验证证实了阴性结果的可靠性：

· 在Ames试验中，siRNA-GalNAc偶联物在1小时内被细菌摄取，每个细胞最多可达约14,000个siRNA分子

· 在体外染色体畸变试验中，CHO细胞摄取量达每细胞约5,500个siRNA分子

· 阴性结果并非由于暴露不足或未进入细胞，而是真实的生物学阴性

这一证据打消了“假阴性"的疑虑，为S13的“豁免"条款提供了坚实的科学支撑。

三、对Ames试验/S9需求的影响

——“豁免"不等于“归零"

对于成熟修饰体系：常规Ames试验量将下降，S9消耗随之减少。

但行业实践显示，GalNAc偶联的siRNA在IND阶段仍普遍完成一轮Ames试验。2016年的暴露验证研究证实，siRNA-GalNAc偶联物可被Ames菌株有效摄取，阴性结果具有真实生物学意义。对于这类项目，S9的需求保持稳定，但对批次一致性和酶活标定的要求更高。

——S9需求的结构性转移

表1：不同场景对S9需求的影响对照表

四、S9试剂供应商的应对策略

ICH S13的“豁免"条款，对S9试剂供应商而言，意味着需求结构的重新分配，而非简单的总量增减。理解这一变化，有助于GLP机构更精准地选择代谢活化系统。

——成熟修饰体系：常规Ames量下降，但“安全确认"需求仍在

对于硫代磷酸酯（PS）、2‘-MOE、2’-OMe等成熟修饰，标准试验组合已被监管机构认定为“冗余"。这意味着常规Ames试验的S9消耗将逐步收缩。

但行业实践显示，GalNAc偶联的siRNA在IND阶段仍普遍完成一轮Ames试验。暴露验证研究证实，siRNA-GalNAc偶联物可被Ames菌株有效摄取，阴性结果具有真实生物学意义。对于这类项目，S9的需求保持稳定，但对批次一致性和酶活标定的要求更高。

——新型修饰结构：Ames是必须的遗传毒性工具

S13明确，新型化学修饰结构需补充遗传毒性试验。这类结构的Ames试验，对S9的代谢活化能力要求更为苛刻：

· 修饰单体释放风险：新型修饰的核苷酸单体可能从代谢产物中释放，理论上存在整合入DNA的风险。要验证“不整合"，需要足够强的代谢活化条件来模拟体内过程。

· 酶活覆盖范围：常规SD大鼠S9高表达CYP1A、CYP2B，而人体核心代谢酶CYP3A4表达偏低。对于依赖人源特异性酶活化的新型修饰结构，大鼠S9可能不足以充分暴露风险。

——GLP机构应如何评估S9选型

表2：不同修饰类型S9需求对比表

给GLP机构的建议：对于寡核苷酸项目的Ames试验，S9选型不应“一刀切"（详见图3）。成熟修饰项目可沿用常规大鼠S9；新型修饰项目建议在方案设计阶段与试剂供应商沟通酶活验证数据，确认所选S9对目标底物的代谢活化能力是否充分。

图3：S9试剂选型决策树

五、总结：S9的“精准打击"时代

ICH S13的落地，标志着寡核苷酸药物的遗传毒性评价从“一刀切"走向“分级管理"。对于GLP机构和S9试剂供应商而言：

齐氏生物——遗传毒理检测试剂专业供应商，提供高活性S9、定制化代谢活化方案，助力寡核苷酸药物遗传毒性评价精准合规！

六、参考文献

[1] ICH. ICH49 Montreal Meeting Press Release: MC approval of the Concept Paper for ICH S13. 2024-11-13.

[2] 识林. ICH里约大会批准使命愿景和战略规划，定稿GCP，多指南取得进展. 2026-06-09.

[3] DIA/FDA Oligonucleotide-Based Therapeutics Conference, Session 8: Hot Topics. 2026-09.

[4] Stock C, Duijndam B, Siezen CLE, et al. Reduced Genotoxicity Testing Is Possible for Noncoding Oligonucleotide-Based Therapeutics Containing Well-Characterized Modifications: A European Regulatory Perspective. Nucleic Acid Ther, 2026, 36(3): 135-146.

[5] Janas MM, et al. Exposure to siRNA-GalNAc Conjugates in Systems of the Standard Test Battery for Genotoxicity. Nucleic Acid Ther, 2016, 26(6): 363-371.

[6] Sisler JD, et al. An Industry Perspective on Key Considerations for the ICH S13 Guidance. Int J Toxicol, 2026, 45(2): 127-135.