“修复者”TA102的低变之谜

引言

上个月在嘉兴的药物安评毒理年会上， 齐氏生物团队和多位老师聊到#TA102菌株#，大家一致反映TA102在Ames试验中表现出的“不敏感"，即回复突变率“较低"甚至个别试验没有突变。针对这个问题，今天从遗传构造和检测原理角度浅谈一下，揭示其背后的“清洁工"机制，并提供相关解决思路，希望给同行老师们提供一些参考。

在Ames试验中观察到TA102菌株的自发回变菌落数（即突变率）相对“较低"，其实是一个常见的现象。这并非意味着TA102不敏感，而是由其独特的遗传构造和检测原理决定的。

一、遗传构造

上表所示，相较TA97、TA98、TA100等常见菌株（它们都缺失uvrB基因），TA102拥有完整的DNA切除修复系统（即uvrB基因完整）和携带 pAQ1质粒，形成了根本区别。尤其携带了pAQ1质粒，这个质粒为其带来了四环素抗性（这是鉴定TA102菌株的重要特征之一），这为它带来了独特的检测谱和一定的额外修复能力，使其在面对紫外线等特定损伤时，比其他uvrB缺陷的菌株更为“坚韧"。

二、独特"技能“

总结：TA102菌株拥有完整的uvrB基因和功能齐全的核苷酸切除修复系统，能高效修复自发损伤，因此在Ames试验中表现出相对较低的自发突变率 。 

三、“突变率低"怎么解读？

1. 正常情况

·“低"是正常的

在TA102菌株的Ames试验中，观察到较低的自发回变菌落数是正常且符合预期的。每个菌株都有其特定的历史对照值范围（例如，TA102的自发回变数可能通常在约200-400个菌落/平板，而TA100可能在约100-200个菌落/平板）。判断结果时，必须将处理组的回变菌落数与该实验室自己建立的TA102阴性对照本底值进行比较，而不是与其他菌株的绝对值或感觉进行比较。

· 敏感性≠高本底

TA102对特定诱变剂（如交联剂）的高敏感性，体现在加入诱变剂后，其回变菌落数相对于其自身的低本底值有极大幅度的增加（例如，增加3倍甚至10倍以上）。它敏锐地检测到损伤，并在修复系统“失守"后表现出突变。而高本底的菌株，其起点高，增加的倍数可能不那么惊人，但同样具有意义。

2.异常情况

如果你观察到TA102的突变率低于该菌株的正常历史范围，甚至几乎没有回变菌落，那么可能意味着菌株或实验操作出现如下问题：

四、如何提高"突变率“

在Ames试验中，提高TA102菌株的突变敏感性，关键在于优化试验条件、确保菌株特性并合理使用代谢活化系统(见：S9代谢活化系统应用指南）。

综上，希望这些具体的策略能帮助您在Ames试验中更有效地使用TA102菌株。如果你在实验过程中遇到其他特定问题，或者想了解更多关于阳性对照物选择的细节，欢迎随时提出！