引言
开学了,实验室原代细胞试验开始了,我的实验室环境(培养箱温度稳定在37±0.5℃,细胞操作环境无菌,维持在25℃以上)正常,血清、培养基等也按照SOP正确添加,为啥细胞贴壁效果不太好?
一、原代细胞为什么要包被?
贴壁生长成为原代细胞体外培养的核心条件,直接影响实验结果的可靠性和细胞功能表达。在原代细胞培养过程中,需要包被处理以增强贴壁能力。
二、如何选择合适的包被材料?
为了适应不同实验需要,需要对培养器皿(培养瓶/培养板)用不同的物质包被后使用,既可以促进细胞贴壁,也可以满足一些特殊检测需要。
PrimaCell™包被培养器皿(细胞贴壁好帮手)
针对原代细胞培养中的不同包被需求,齐氏生物特推出4大包被系列(见下图):
(1)I 型胶原包被
I 型胶原是组织和器官中最常见的胶原蛋白,在皮肤、肌腱和骨骼中含量丰富。I型胶原是纤维形成胶原,是多细胞生物的细胞外基质的主要结构成份,由3条以甘氨酸-脯氨酸-羟脯氨酸三联交替的胶原多肽链形成三螺旋结构,能促进细胞的贴壁和增殖、特异性形态和功能表达,常用于上皮细胞、肝细胞、肌细胞等原代细胞的培养。
(2)多聚赖氨酸(Poly-Lysine)包被
多聚赖氨酸(Poly-Lysine)包被在细胞板表面,促进细胞贴壁。贴壁依赖性细胞,通过包被带正电的高分子多聚赖氨酸,可提高无血清或低血清培养环境下的细胞贴壁率,加强培养器皿表面对血清蛋白和细胞外基质蛋白的吸附,加快细胞的增殖。多聚赖氨酸(Poly-Lysine)包被的培养板适用于神经元细胞培养、神经胶质细胞培养及转染细胞系的培养,能够促进神经细胞分化和神经突的生长。
(3)明胶包被
明胶是由胶原水解后得到的水溶性蛋白多聚体。齐氏生物PrimaCell™明胶包被板能促进多种细胞的贴壁和生长,用于培养正常或转染细胞,如血管内皮细胞、心肌细胞、胚胎干细胞、胰岛细胞等。
该系列包被耗材具有以下特点:
① 促进多种细胞的贴壁;
② 预包被的明胶层节省实验准备的时间和费用;
③ 批次间的稳定性保证实验结果的可重复性。
(4)基质胶包被
基质胶是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质, 其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。
基质胶用于制备各种要求的基底膜基质,用于细胞信号研究,诸如:鼠肾干细胞形成肾小管过程中生长因子作用研究,鼠乳腺上皮干细胞的基因表达研究,transwell的肿瘤侵袭力实验等。
三、如何选择供应商?
※看品牌
齐氏生物作为一家资深细胞培养公司,历经15年的积累,公司细胞类产品线覆盖经工程改造的稳转细胞系、具有良好生理相关性的原代细胞、以及血清、培养基和细胞培养相关试剂、耗材,为您提供从基因功能研究、药物筛选到毒性评价的一站式解决方案!
※看品控
齐氏生物4大系列包被培养器皿,每批均经过细胞活力和培养性能测试,批次间良好的稳定性。4℃保存,稳定保存6个月。