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如何选择适合研究的肝细胞培养试剂盒?原代 vs 永生化细胞系

更新时间:2025-07-22点击次数:159
   选择适合研究的肝细胞培养试剂盒需基于实验目标、周期及成本综合考量,原代细胞与永生化细胞系各有核心优势:
  原代肝细胞培养试剂盒(如IPHASE两步胶原酶灌流法试剂盒)适合药物代谢、毒性评估等高真实性需求场景。其核心优势在于:
  功能保真性:试剂盒通过优化胶原酶浓度与灌注流程,分离的细胞存活率超90%,且维持CYP450酶、II相代谢酶等正常生理浓度,可精准模拟体内代谢环境。例如,Takara的CellartisPowerPrimaryHEPMedium支持原代肝细胞培养14天以上,仍保持尿素合成、药物转运等功能。
  短期实验经济性:单次实验成本低,试剂盒提供即用型灌流液、纯化液等,24孔板可重复使用400次,适合短期药物筛选或机制研究。
  伦理与成本优势:避免动物实验伦理争议,且成本仅为动物模型的1/3,符合3R原则。
  永生化肝细胞系试剂盒(如SV40T或hTERT介导的永生化试剂盒)适合长期传代、高通量筛选等场景。其核心优势在于:
  增殖稳定性:通过导入永生化基因(如SV40T抗原),细胞可传代50代以上,群体倍增时间缩短至28小时,解决原代细胞体外增殖受限问题。例如,永生化胎肝细胞系IMF-Hep的ALB与CYP3A4表达量达原代细胞的85%,且30代内核型稳定。
  功能可调控性:部分试剂盒支持iPS细胞向肝细胞定向分化,获得功能成熟的肝细胞,适用于肝脏发育或疾病模型研究。
  长期实验成本效益:虽初始成本较高,但长期使用可大幅降低单次实验成本,适合需要反复传代的实验。
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